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蘇木素染色液的使用方法和使用注意事項
更新時間:2022-11-30   點擊次數:3454次
  蘇木素染色液是集多種經典的蘇木素染液而改進生產的,簡化了操作步驟,縮短了操作時間,而且染色液內不使用汞、甲醇、二甲苯等有毒物質,是一種無毒環(huán)保的染料。可用于組織切片,血涂片,骨髓切片的染色,也能用于細胞涂片的染色,檢測原理是帶正電荷的堿性染料蘇木素與帶負電荷的酸性物質結合使其被染成藍色。
  使用方法
  1.樣本染色前處理
  1)石蠟切片
  ① 脫蠟:二甲苯脫蠟2次,每次10~15 分鐘;
  ② 水化:95%、70%、30%乙醇各 2 分鐘,溫水2 分鐘。若脫蠟不干凈,需再次溫水2 分鐘。
  2)冰凍切片
  ① 回溫:將-20℃冰箱保存的冰凍切片取出室溫放置回溫約5~10 分鐘;也可以直接放到37℃孵育箱中進行回溫;
  ② 水化:將回溫好的切片放入水中浸泡 30~60 秒左右。
  3)血涂片及骨髓涂片
  ① 推片:取全血 3 微升左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片 30 度角,置于血滴正前方,稍往后移與血滴接觸,血滴沿推片下緣散開,再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動,至血液鋪完血膜為止。
  ② 固定與水化:涂片空氣自然干燥后,95%乙醇固定2~3 分鐘,水洗約30~60 秒。
  4)培養(yǎng)細胞
  ① 固定:4%多聚甲醛固定10分鐘以上;
  ② 清洗:蒸餾水洗滌2次,每次2~3分鐘。
  2.染色
  滴加蘇木素染液數滴蓋滿樣本,染色3~8 分鐘,流水沖洗30~60 秒。即可鏡檢。【注】:染色后的玻片一般可保存一年以上。若想長期保存建議進行封片操作。
  3.封片(可選)
  方法一,玻片自然干燥,干后用商業(yè)化封片劑或中性樹膠封片;
  方法二,染色好的玻片無需自然干燥,立即放入無水乙醇中脫水兩次,每次約 5~10 秒,無水乙醇干后即可用商業(yè)化封片劑或中性樹膠封片。
  4.染色結果
  鏡檢結果:細胞核呈藍紫色。
  注意事項
  1. 染色太淺可再次復染。染色太深可用 0.05%鹽酸乙醇脫色。
  2. 若做H-E染色(蘇木精-伊紅染色),無需脫色。只需蘇木素染色后,水洗1分鐘后,直接用伊紅染色。
  3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
  4. 本產品僅作科研用途!
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