熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針?lè)肿犹禺愋越Y(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)技術(shù)是利用熒光標(biāo)記的特異性寡核苷酸片段作為探針，與染色體、細(xì)胞或組織中的核酸按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行雜交，通過(guò)熒光系統(tǒng)檢測(cè)，對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性或相對(duì)定位分析。相對(duì)于傳統(tǒng)的核型分析技術(shù)，F(xiàn)ISH技術(shù)具有快速及特異性高的優(yōu)點(diǎn)。更由于其直觀性，成為眾多遺傳學(xué)診斷技術(shù)的有效驗(yàn)證方法，具有廣闊的應(yīng)用前景。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)技術(shù)有哪些主要優(yōu)勢(shì)？
① 安全、快速、靈敏度高；
② 探針能較長(zhǎng)時(shí)間保存；
③ 多色標(biāo)記，簡(jiǎn)單直觀；
④ 可用于中期染色體及間期細(xì)胞的分析；
⑤ 可應(yīng)用于新鮮、冷凍或石蠟包埋標(biāo)本以及穿刺物和脫落細(xì)胞等多種物質(zhì)的檢測(cè)。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)的技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是：如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素、可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)技術(shù)系用熒光基團(tuán)標(biāo)記特異性探針，再將標(biāo)記了熒光信號(hào)的探針與待測(cè)樣本進(jìn)行原位雜交，在熒光顯微鏡下對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行辨別和計(jì)數(shù)。通過(guò)熒光信號(hào)的顏色和數(shù)目的異常與否，達(dá)到對(duì)染色體疾病診斷、惡性腫瘤預(yù)測(cè)及預(yù)后判斷的目的。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位，而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。
